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新污染物檢測特色分析技術(shù)——紅外拉曼顯微鏡助力微塑料化學(xué)成像可視化分析

更新時(shí)間:2024-04-07      點(diǎn)擊次數:332


微塑料



微塑料是指直徑小于5mm的塑料碎片和顆粒。近年來(lái),以微塑料為代表的新型污染物受到的關(guān)注度持續提升,已經(jīng)有大量研究報道,微塑料對海洋生態(tài)以及生物和人類(lèi)健康存在持久的、確定和不確定的危害。隨著(zhù)微塑料污染關(guān)注度的提升和其生態(tài)效應研究的深入,也對其研究手段也提出了更高的需求。


化學(xué)成像是將具有空間分辨能力的譜學(xué)信息與位置信息分析進(jìn)行有機結合的表征技術(shù),通過(guò)獲取來(lái)自被測樣品形貌、表面等信息進(jìn)而表征其相關(guān)的物理和化學(xué)性質(zhì)。光譜成像作為化學(xué)成像中的重要一類(lèi),是通過(guò)使用不同波長(cháng)的入射光照射樣品表面空間位點(diǎn),收集所產(chǎn)生的反饋信號,構建反映樣品表面化學(xué)和物理特性的圖像。通過(guò)利用島津特色的AIRsight紅外拉曼顯微鏡,實(shí)現了對不同尺寸的微塑料樣本的原位、多模態(tài)(紅外與拉曼)化學(xué)成像分析,為微塑料檢測和研究提供全新的方法和思路。


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特色研究方案



本研究使用島津紅外拉曼顯微鏡對不同粒徑PS-DVB微塑料樣本(98μm,16μm)進(jìn)行顯微紅外及顯微拉曼分析(圖1A、圖2A)。以1003cm-1(苯環(huán)呼吸振動(dòng)峰)為微塑料的拉曼光譜特征峰提取化學(xué)成像(圖1D),同時(shí)以3082cm-1(苯環(huán)芳香C-H伸縮振動(dòng)峰)為微塑料的紅外光譜特征峰提取化學(xué)成像(圖1C)。由圖1A和圖1B中可見(jiàn),對于98μm這樣尺寸較大的微塑料樣本,通過(guò)紅外光譜成像和拉曼光譜成像均可獲得與光學(xué)照片匹配度較高的化學(xué)成像(圖1C和圖1D),二者的空間分辨率可以滿(mǎn)足對單個(gè)微塑料顆粒進(jìn)行有效成像和甄別。但是由于紅外光譜的光斑可以調節至更大,而拉曼光譜光斑受限于激光光源無(wú)法調節,所以紅外光譜成像更適合于大尺寸微塑料樣本的單顆粒形態(tài)成像分析。

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圖1 98μm PS-DVB微塑料紅外與拉曼成像對比圖

對于小粒徑PS-DVB微塑料樣本(16μm),以1003cm-1(苯環(huán)呼吸振動(dòng))為微塑料的拉曼光譜特征峰提取化學(xué)成像(圖2D),同時(shí)以3082cm-1(苯環(huán)芳香C-H伸縮振動(dòng))為微塑料的紅外光譜特征峰提取化學(xué)成像(圖2C)。由圖2A和圖2B中可見(jiàn),對于16μm這樣尺寸較小的微塑料樣本,拉曼光譜成像可獲得與光學(xué)照片匹配度較高的化學(xué)成像(圖2C和圖2D),其成像分辨率可以滿(mǎn)足對單個(gè)微塑料顆粒進(jìn)行有效成像和甄別;而紅外光譜成像對微塑料顆粒的成像幾乎呈現為區域連片的趨勢,無(wú)法實(shí)現對單個(gè)微塑料顆粒進(jìn)行有效成像和甄別。

進(jìn)而借助于A(yíng)IRsight紅外拉曼顯微鏡可實(shí)現對兩種光譜原位采集的功能特點(diǎn),可以實(shí)現對微小區域的微塑料進(jìn)行紅外光譜成像和拉曼光譜成像的原位采集和對比。如圖2黑線(xiàn)圈中區域內有7個(gè)16μm PS-DVB微塑料顆粒,在拉曼光譜成像中,可以清晰呈現出7個(gè)微塑料的單顆粒形態(tài)的化學(xué)成像,而在紅外光譜成像中則無(wú)法有效呈現,僅可獲得整體分布走向趨勢的化學(xué)成像。由此可見(jiàn),相比較于紅外光譜成像,拉曼光譜成像更適用于小尺寸的微塑料樣本的單顆粒形態(tài)成像分析。

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圖2 16μm PS-DVB微塑料紅外與拉曼成像對比圖

而在天然湖泊水中,由于基質(zhì)自身含有的大量浮游生物及其他雜質(zhì)成分(圖3A中圈出部分為天然藻類(lèi))會(huì )產(chǎn)生高熒光背景干擾正?;瘜W(xué)成像,可采用1003cm-1(苯環(huán)呼吸振動(dòng)特征峰峰端)和950 cm-1(苯環(huán)呼吸振動(dòng)特征峰峰底)的強度比率進(jìn)行化學(xué)成像提取來(lái)克服基質(zhì)產(chǎn)生的熒光背景干擾,如圖3B可見(jiàn),利用AIRsight的拉曼成像模式和軟件自帶的多類(lèi)型圖像提取功能,可以實(shí)現對實(shí)際湖泊水樣本中的微塑料單顆粒進(jìn)行高空間分辨率化學(xué)成像。

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圖3 天然湖泊水中微塑料拉曼成像

總結



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AIRsight紅外拉曼顯微鏡通過(guò)將帶有成像功能的顯微紅外光譜和顯微拉曼光譜進(jìn)行有機結合,為微塑料樣本研究提供了大尺寸跨度、原位、多模態(tài)的光譜表征與化學(xué)成像分析手段,有望成為食品安全、生態(tài)環(huán)境等大健康領(lǐng)域更為有力的研究方法和工具。



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